TMT(Tandem Mass Tag)技术是由美国Thermo Fisher Scientific开发的一种多肽体外标记技术。该技术采用了6标(TMTsixplex™ Isobaric Label Reagent Set)、10标(TMT10plex™ Isobaric Label Reagent Set )、16标(TMTpro 16plex)同位素标签,通过与肽段特异氨基酸位点相连实现不同来源的肽段标记,然后进行串联质谱分析,监测碎裂下来的标签实现肽段定量。一次实验可灵活比较最多16种不同样本中蛋白质的相对含量。
(1)鉴定灵敏度高
标签定量,不同组的样本可以一起上机,降低系统误差,准确度高,灵敏度高
(2)样本通量小
适用于样本数量不多的项目
(3)定量稳定性高
无物种特异性限制,理论上可用于所有物种分离能力强,鉴定蛋白总量多
指标 | 参数 |
---|---|
检测范围 | 全蛋白质 |
仪器平台 | Q Exactive™ HF-X |
周期 | 40自然日 |
交付标准 | 原始数据+标准分析 |
适用物种 | 不限物种 |
样本类型 | 样本量 | 注意事项 |
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动物组织 | 常规组织 (脑、心、肝、脾、肺、肾、肌肉等) |
150 mg |
坚硬组织(软骨、毛发) | 500 mg | |
植物组织 | 柔软组织 (木本植物的叶、花等,草本植物,藻类,蕨类植物) |
300 mg |
坚硬组织 (树根、树皮、树枝,果实种子等) |
3 g | |
花粉 | 200 μl | |
微生物 | 常见细菌、真菌菌种 | 100 mg/100 μl沉淀 |
细胞 | 悬浮/贴壁培养细胞 (因为细胞大小不一,重点是必须达到要求的体积) |
5×106/30 μl细胞沉淀 |
液体类 | 血浆/血清 | 300 μl(不去高丰度) 或500 μl(去除高丰度) |
唾液/泪液 | 2 ml | |
培养基上清(需评估) | 30 ml |